Gibco胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
Gibco胎牛血清操作步驟:
血清通常在細胞培養(yǎng)中作為基礎生長培養(yǎng)基的添加劑。常用血清是胎牛血清(FBS),也稱FCS。胎牛血清是從適合人類衛(wèi)生習慣的農場收集的。有時,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供體牛血清。在細胞培養(yǎng)中,血清供應了豐富的高分子蛋白,低分子量營養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時,血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分,起到保護細胞的作用。在細胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清,主要根據基礎培養(yǎng)基化學成分,培養(yǎng)細胞的類型和培養(yǎng)體系而定。
1、采集
在胎牛血清生產過程中,全血使用無菌一次性塑料袋收集,待凝結后分離,收集和冷凍儲存血清??刂铺ヅQ宓某跏际占强刂平K血清產品質量的關鍵因素。只有初始原料符合我們的規(guī)范時才能允許生產。
2、血清原料
在市場存在兩個胎牛血清標準:美國農業(yè)部標準(USDA)和歐洲標準。美國農業(yè)部標準,原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD)疫情的國家,才可自由進口到任何國家,用于安全生產。而且研究者只有使用符合這種標準的血清,才被允許將其細胞和細胞產品送至其他同樣有嚴格進口條款的國家,進行合作交流。
3、處理過程
優(yōu)選數(shù)個批次凍存血清進行解凍,檢驗其內毒素和血紅素的含量,滿足標準的才能在冷藏條件下充分混合繼續(xù)加工,進一步進行過濾除菌。NQBB依次通過預過濾和膜過濾來處理胎牛血清。后的過濾步驟為連續(xù)三次用100nm的濾膜過濾。過濾結束,血清采用無菌工藝進行分裝,整個過程有效確保終產品無菌。血清生產的空氣潔凈度為100級。所有分裝工作臺都通過高效微??諝膺^濾器過濾,并保持正壓分裝環(huán)境,對總微粒、懸浮微粒數(shù)和壓力進行監(jiān)控。分裝后,終產品迅速-20度凍存,并隔離,直到所有的質量控制檢測完成。
4、FBS質量控制
每批胎牛血清檢測確認符合各項標準,并以書面的方式記錄在質檢報告中。
5、質量保證
胎牛血清生產過程在一個嚴格控制的條件下進行。紫外線滅菌,過濾除菌和分裝是關鍵生產環(huán)節(jié),可以確保血清的品質。與血清生產相關的數(shù)據作為專門的檔案記錄,從初步采集的原料到成品儲存的整個生產過程,以及質量控制檢測和結果都有備案,并可以在監(jiān)控條件下追溯源文件。 胎牛血清生產過程遵循歐洲議會關于體外診斷的標準。